长江流域每年4月底5月初，水温稳定在18℃以上，即可将亲鱼从越冬池移入繁殖池进行杂交制种。繁殖池土池或水泥池，面积0.5～2亩，水深1～1.5米为宜。亲鱼入池前10天，繁殖池必须清整消毒，杀死野杂鱼和其它有害生物，并施足基肥以培养饵料生物，以提高鱼苗成活率。放养的亲鱼要选择性状好，体质健状的个体、尼罗罗非鱼雌鱼体重在150克以上，以250～500克为好，奥利亚罗非鱼个体要比尼罗罗非鱼雌鱼稍大些，按雌雄比为3：1或4：1放入繁殖池。放养密度以雌鱼为准计算，根据雌鱼大小，每平方米可放1～2尾。一般每亩放养250～500克的雌鱼600～800尾，按雌雄3：1配组，则雄鱼为200～300尾。亲鱼入池后，每周施发酵粪肥100～200千克，每天喂饲1～2次，按池鱼总重的3～5%投喂。待水温上升到22℃以上，亲鱼入池后15天左右，便开始陆续产卵、出苗，可见到池边水面上一小群、一小群游动的鱼苗，这时要及时捞苗。一般在早晨或傍晚见苗较多的时间捞苗，可采用弥网或小拖网，顺塘四周拖捞。捞出鱼苗放在密眼网箱内暂养，待捞到一定数量后，即过数放入培育池中培育苗种。奥尼鱼有大鱼苗吃小鱼苗的习性，须每隔10天左右用网捕出捞出苗时存塘的大鱼苗。
苗种培育池面积1～2亩，前期水深0.6～0.7米，后期1～1.5米为宜。清塘消毒，施基肥与家鱼苗种池相同。亩放养3～5万尾，最多不超过8万尾，以加快苗种生长，提早养成商品鱼。鱼苗下池后，每天上、下午各泼洒豆浆1次，每次15～20千克，同时每天泼洒粪肥50千克。10天后增喂米糠或豆饼糊，每天1～2次，沿池边泼洒，以2小时吃完为度。随着鱼体长大，可适当增加投饵量和施肥量。培育期间每周加水1次，使池水逐渐加深到1～1.5米，以扩大鱼苗活动范围和促使饵料生物繁殖生长，加水时防敌害进入，鱼苗经25～30天培育，长到4～6厘米，即可出塘饲养成鱼。秋季杂交繁殖的鱼苗，养不了成鱼，可越冬保种翌年养成鱼。