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多倍体牡蛎的培育

多倍体牡蛎是指体细胞中含有3组或更多组染色体的个 体而言。三倍体牡蛎由于其育性差而生长快、风味好,从而具 有较高的经济价值。目前,三倍体的产生有以下三种方法:

(1)生物方法:利用四倍体与二倍体杂交产生100%的三 倍体。

(2)物理方法:利用水静压或温度休克抑制一个极体的 排放。

(3)化学方法:主要利用细胞松弛素B(CB)处理受精 卵,抑制第二次成熟分裂。

由于四倍体系的建立较困难以及,水静压和温度休克的 诱导率较低且不稳定,这里只简单介绍利用CB诱导牡蛎产 生三倍体的方法。

(一)采卵

采用解剖法获取精卵。解剖每个牡蛎之前需消毒工具。牡 蛎解剖后,首先镜检分辨雌雄并检查精卵的质量,选取性腺 发育好的个体待用,发育差的剔除。雌雄严格分开放置。卵子 剥离后,先用60微米的筛绢滤去较大的组织碎片,再用20微 米的筛绢滤去组织液及破碎的卵子。精液以20微米的筛绢过 滤。

(二)受精

采用人工方法受精。向卵液中加入适量精液,搅动均匀, 以每个卵子周围有2~3个精子为宜。若精子过多,可在加入 精子5~10分钟后,用20微米的筛绢过滤洗卵。

(三)处理

当50%的受精卵放出第一极体后,向卵液中加入CBDMSO(CB-二甲亚砜)至CB浓度为0.5~1.0毫克/升。处 理15~20分钟后,用20微米的筛绢滤去药液并冲洗受精卵, 然后将受精卵移入孵化池中孵化。

CB是一种粉末状剧毒物质,不溶于水,但溶入DMSO。 DMSO是一种万能溶剂,有毒性,易穿过皮肤及乳胶,操作时 要格外慎重。

(四)幼虫及稚贝培育

三倍体牡蛎的幼虫及稚贝培育与二倍体相同。

(五)倍性检查

牡蛎的倍性主要通过染色体计数、流式细胞计、显微荧光 光度计及核径的测量来判断,也可通过极体计数、微核计数及 电泳方法来检查。

(六)三倍体牡蛎的表现

三倍体牡蛎在繁殖季节里有较低程度的性腺发育,仅有 半数雄体的配子发育过了精母细胞期,雌体严重滞育。三倍 体牡蛎的雌雄性比与二倍体相近,但雌雄同体者明显增多。在 繁殖季节里,二倍体牡蛎的糖原含量平均下降72%,而三倍 体牡蛎仅下降8%。从第二年开始,三倍体牡蛎的生长明显快 于二倍体,这与三倍体的滞育有关,也可能与其较高的杂合度 有关。