二、常用培养基的配制

1. 细菌海水保种液 丙三醇 20 mL NaCl 2 g 蒸馏水定容至100 mL，121℃灭菌20 min。 2. 细菌淡水保种液 丙三醇 20 mL NaCl 0.5 g 蒸馏水定容至100 mL，121℃灭菌20 min。 3. 营养肉汤 蛋白胨 10 g 牛肉膏粉 3 g 氯化钠 20 g 蒸馏水 1 L 加热煮沸待冷却后调pH 7.2～7.6，121℃灭菌15 min。 4. 半固体培养基 牛肉膏 3 g NaCl 20 g 琼脂 3～6 g 蛋白胨 10 g 蒸馏水 1 L pH 7.0～7.2，120℃灭菌20 min。 5. 一般固体培养基 (1)按照液体培养基配方，准备好液体培养基，在高温高压灭菌前，加入下列试剂中的一种。 Agar(琼脂： 铺制平板用) 15 g/L Agar(琼脂： 配制顶层琼脂用) 7 g/L Agarose (琼脂糖： 铺制平板用) 15 g/L Agarose (琼脂糖： 配制顶层琼脂用) 7 g/L (2)高温高压灭菌后，戴上手套取出培养基，摇动容器使琼脂或琼脂糖充分混匀 (此时培养基温度很高，小心烫伤)。 (3)待培养基冷却至50～60℃时，加入热不稳定物质 (如抗生素)，摇动容器充分混匀。 (4)铺制平板 (30～35 mL培养基/90 mm培养皿)。 6. MH琼脂培养基 牛肉膏 300 g 琼脂 17 g 可溶性淀粉 1.5 g 酪蛋白酸水解物 17.5 g 蒸馏水 1 L pH 7.1～7.5，121℃灭菌15 min，冷却至50℃，倾注等量培养基于灭菌直径约9 cm培养皿(约4 mm 高)。 7. TCBS 琼脂培养基 TCBS琼脂 89.1 g 蒸馏水 1 L 加热煮沸待冷却到56℃左右倒平板。 8. Zobell 2216E培养基 酵母膏 1 g 蛋白胨 5 g 磷酸铁 0.1 g 陈海水 1 L 调节pH 7.2～7.5，加琼脂粉20 g煮沸后，121℃灭菌20 min。 9. 普通琼脂培养基 牛肉膏 3.0 g 蛋白胨 10.0 g 氯化钠 5.0 g 磷酸二氢钾 1.0 g 琼脂 15.0 g 蒸馏水 1 L 混匀，加热溶解，调pH7.6分装，121℃灭菌20 min，冷却至50℃倾注平板。