一、亲贝的选择与蓄养
1.亲贝的选择
用作亲贝的牡蛎应大小整齐,体质健壮,无损伤,无病害。一般褶牡蛎1~2龄,壳长 5~6 cm;大连湾牡蛎和近江牡蛎2~3龄,壳长10 cm以上;太平洋牡蛎2~3龄,壳长9 ~10 cm。
2.蓄养方式
亲贝经洗刷,除去污物和附着物后,可入池蓄养。一般采用网笼或浮动网箱蓄养,蓄 养密度视个体大小而定,一般80~100个/立方米。山东沿海常温育苗亲贝入池时间一般 在5月末6月初,水温15℃~17℃。在加温育苗中,升温促熟可从2~3月份开始。
3.管理内容
(1)换水:前期可每天倒池一次,后期采用大换水或流水培育。
(2)投饵:每2~3 h投喂一次,以硅藻、金藻或扁藻等单胞藻为主,饵料不足时亦可投 喂鼠尾藻磨碎液及淀粉、酵母等代用饵料(表7-8)。
(3)充气:亲贝培育期间宜采用连续充气,以增加水体中的溶解氧。
(4)水温控制:培育前期日升温1℃~2℃,水温达15℃以上时,日升温0.5℃~1℃, 至22℃左右,稳定。
(5)性腺发育观测:定期取样测量肥满度,并镜检精、卵发育情况。
此外,施加抗菌素抑菌或投放光和细菌,以及水质检测等都是必要的。
表7-8 牡蛎的代用饵料
种类 | 代用饵料 | 作者 |
太平洋牡蛎(Crassostrea gigas) | 藻类、糖类 | Langdon和Waldock,1981 |
地瓜粉、豆粉、活性干酵母、鼠
尾藻磨碎液 |
王昭萍、王如才等,1996 | |
螺旋藻粉 | 山东荣成寻山育苗场,1998 | |
大连湾牡蛎(C.talienwhanensis) | 淀粉、食母生 | 王如才,1987 |
食用牡蛎(Ostrea edulis) | 鱼油、大豆卵磷脂、植物油、维
生素E |
Heras et al.,1994 |
悉尼岩牡蛎(Saccostrea commercialis) | 酵母 | Nell et al.,1996 |
二、采卵与孵化
1.精、卵的获得
牡蛎的精、卵可以通过自然排放、诱导排放或解剖方法获得。
(1)自然排放:让亲贝充分发育成熟,自行排放精、卵。当牡蛎的性腺丰满,覆盖整个 消化腺,肥满度达到25%以上时,基本上具备了自然排放的条件。接近产卵期时,每天傍 晚换水后注意观察亲贝有无排放精、卵,早上换水前取池底水样镜检有无卵子。经自然排 放的精、卵质量好,受精率与孵化率较高。
(2)诱导排放:采用阴干刺激、流水刺激、升温刺激或降低盐度等方法,诱导性腺发育 成熟的亲贝集中大量排放精、卵。这些诱导方法单独使用或几种结合使用皆可。一般将 亲贝阴干3~5 h,流水刺激1~1.5 h,然后放入升温3℃的海水中;也可在阴干后,直接用 升温3℃~4℃的海水流水刺激1~1.5 h;也可在夜间将亲贝阴干10~12 h,再置入海水 中排放。采用上述方法,效应时间一般2~5 h,有时长达10 h。通过气温升温刺激,然后 用常温海水流水刺激1~2 h即可排放,这种方法效应时间较短。
(3)解剖取卵:用解剖刀从韧带部挑起,割断闭壳肌,去掉右壳,露出软体部,用水滴法 检查性别。将卵巢取下,放入80目网袋中,轻轻搓洗,将卵子洗下后用250目筛绢过滤, 去掉大的组织和杂质。为了提高受精率,解剖的卵需在海水中浸泡0.5~1 h。
自然排放和诱导排放的优点是不杀伤亲贝,卵子成熟较好,但往往精子过多,影响胚 胎发育。解剖取卵可以避免精子过多的弊病,但卵子发育同步性较差,可在受精前先将卵 子在海水中浸泡一段时间(以1 h左右为宜),以促进卵子进一步成熟,提高卵子的受精 率。
2.受精与孵化
无论是催产还是自然排放,发现排放后应尽量将雄贝立即捞出单独排精,以避免精液 过多。但太平洋牡蛎一旦性腺成熟,排放精、卵集中,在很短时间内可把水变混浊,此时应 将亲贝全部取出,放入另池中排放。在实际生产中往往很难将雄贝及时捞出,就易造成精 液过多。在正常情况下,精液浓度以每个卵子周围有3~5个精子为适。精液过多时可用 沉淀法洗卵3~4次,至水清无黏液为止。
受精卵孵化密度为50~100个/毫升,为防止受精卵沉积影响胚胎发育,可每隔20 min用耙轻搅池水一次,也可采用微弱充气。一般在水温22℃左右时,太平洋牡蛎的受 精卵经22 h左右发育为D形幼虫,此时即可选育,并进行分池培育。
卵子受精后,在23℃~25℃条件下,一般经过24 h发育为D形幼虫。这时用350目 的筛绢将幼虫选入另池培育。生产上一般在此时统计D幼率作为孵化率:
3.选幼
发育到D形幼虫时,立即停止充气,用300目筛绢制成的拖网在池水表层拖网,将拖 网拖到的幼虫置于刚注入新鲜过滤海水的池中。为防止杂质随幼虫进入新池中,应用稍 大网目(100目)的筛绢做成网箱,将幼虫倒入网箱中,让幼虫疏散到池水中,而杂质留在 网箱里。也可采用虹吸法将幼虫收集起来放入他池培育。虹吸使用网箱也是利用JP- 120筛绢制成。在实际生产中,常常将拖网与虹吸法并用,即先用拖网拖取上层幼虫,再 用网箱虹吸滤选幼虫。
三、幼虫培育
幼虫培育指从D形幼虫开始到幼虫附着变态为稚贝为止这一阶段。幼虫培育期间 管理如下:
(1)幼虫密度。D形幼虫的密度以8~15个/毫升为宜。随着幼虫的生长,可适当降 低密度。采用高密度反应器培育牡蛎幼虫,采用流水培育,其密度可高达150~200个/毫 升。
(2)换水。每日换水2~3次,每次换水1/2~1/3水体,换水温差不要超过2℃,也可 采用流水培育进行水的更新。
(3)投饵。对太平洋牡蛎幼虫适宜的饵料主要有叉鞭金藻、小硅藻、等鞭金藻、扁藻 等。D形幼虫选育后即开始投饵。幼虫培育前期,金藻效果较好;扁藻是壳顶幼虫以后的 良好饵料,幼虫壳长达110~130 μm时,就能大量摄食扁藻,生长速度也加快。金藻饵料 效果好,与扁藻混合投喂效果更佳。
投饵量应根据幼虫的摄食情况及不同发育阶段进行调整,适当增减,表7-9可供参 照。一般日投饵2~3次,在换水后投喂。投喂时,坚持“勤投少投”的原则,禁止使用污染 和老化的饵料。
表7-9 太平洋牡蛎人工育苗的日投饵量
发育阶段 | 幼虫壳长(μm) | 日投饵量(×104细胞/毫升) | |
叉鞭金藻 | 扁藻 | ||
D形幼虫 | 80~100 | 1.5~2 | — |
壳顶初期 | 100~150 | 1.5~2 | 0.2~0.3 |
壳顶中期 | 150~200 | 2~2.5 | 0.4~0.6 |
壳顶后期 | 200~300 | 3~3.5 | 0.8 |
附着稚贝 | 300以上 | 3.5~4.5 | 0.8~1 |
(4)选优。由于牡蛎幼虫发育的同步性较差,在生产上将大小整齐、游动活泼的优质 幼虫选出集中培育是必要的。牡蛎幼虫有上浮习性,并有趋光性,故可用拖网将中、上层 的幼虫选入另池培育。也可采用虹吸法,用较大网目的筛绢将个体较大的幼虫选优培育。
(5)充气与搅动。在幼虫培育过程中均可充气,这可增加水中的溶解氧,使饵料和幼 虫分布均匀,有利于代谢物质的氧化。无条件充气,可每日搅动4~5次,一般充气加搅拌 为好。
(6)倒池与清底。由于残饵、死饵及代谢物质的积累,死亡的幼虫、敌害和细菌的大量 繁殖,氨态氮大量贮存,严重影响水的质量和幼虫发育,因此在育苗过程中要倒池或清底。 倒池采用拖网或过滤方法,每3天左右倒池一次,两次倒池之间用清底器清底。
(7)抗生素的利用。必要时,为防止有害微生物的繁生,可利用(1~2)×10-6的土霉 素、氯霉素或青霉素能抑菌并提高幼虫的成活率。一般情况下,要优化育苗水体的环境, 创造有利于有益微生物繁殖和幼虫发育生长的条件。
(8)除害。常见的敌害有海生残沟虫、游扑虫和猛水蚤等,其危害方式主要是争夺饵 料、败坏水质,这些种类繁殖较快,在种间斗争中占优势。对敌害要以防为主,过滤水要干 净,容器要消毒,避免投喂污染的饵料。一旦发现敌害,可以采用大换水或机械过滤将幼 虫移入另池培育,也可用药品杀灭:鞭毛虫、纤毛虫用0.4×10-6硫酸铜杀灭,猛水蚤用1 ×10-6敌百虫杀灭。
(9)水质分析和生物观察。水质分析主要测量育苗用水的理化因子,牡蛎幼虫培育过 程中,一般要求pH值为8.0~8.4,溶解氧含量高于4.5 mL/L,氨态氮含量低于0.1 mg/L。
生物观测包括饵料密度、幼虫密度和幼虫生长测量,以及幼虫摄食情况和敌害生物的 检查。
四、采苗器的投放
牡蛎幼虫在水中经过一段时间的浮游生活之后,便要固着下来变态成稚贝,此时便可 投放采苗器采苗。
(1)采苗器种类:常用的采苗器有牡蛎壳、扇贝壳、蚶壳、塑料板(盘)、橡胶胎、瓦片等。 采苗器必须处理干净,贝壳要严格除去其上的闭壳肌及附着物,塑料板及竹片等应长时间 浸泡洗刷,除去有毒物质,投放之前,应以10×10-6的青霉素处理0.5 h以上。
(2)投放时间:投放采苗器应在幼虫即将变态之前,水温20℃~23℃条件下,太平洋 牡蛎的幼虫培育20 d左右、壳长达280~300 μm时,有20%出现眼点,即可投放采苗器, 或者筛选牡蛎眼点幼虫入另外池中,再投放采苗器进行采苗。由于牡蛎幼虫发育的同步 性较差,同批幼虫大小差异显著,可筛选牡蛎眼点幼虫入另池中,再投放采苗器进行采苗。
(3)投放方法:贝壳可串联成串后垂挂于池中,也可平铺于池底或放入扇贝笼中采苗, 一般投放量为5 000壳/立方米。塑料盘(直径30 cm)或板悬挂于采苗池中,一般50~60 盘/立方米。
(4)采苗密度:以0.25~0.5个/平方厘米稚贝为宜。以贝壳为采苗器时,一般每壳附 苗10个即可。为防附苗密度过大,可将密度较大的幼虫分为多池采苗,或者多次采苗,即 将采苗器分批投入并及时出池。
五、异地采苗
异地采苗即将牡蛎幼虫运往他地进行采苗的方法。最近几年,美国一些孵化场专门 从事牡蛎幼虫的培育工作,当幼虫出现眼点以后,售给生产单位进行生产性采苗,甚至在 日本、韩国等地培育眼点幼虫,再运送到美国进行采苗。
眼点幼虫的运输方法如下:将眼点幼虫过滤出来,用筛绢包裹,外放吸水纸保持一定 的湿度,置于泡沫塑料箱中,利用双层塑料袋在箱内分置高盐度低温水(水温-4℃左右) 或冰块,再进行干法运输。也可利用保温箱,使幼虫在低温、高湿度状况下干法运输。只 要容器内保持一定的湿度和4℃~8℃低温,一般10 h左右的运输,可达100%的成活率。
异地采苗可以充分利用某些单位对虾育苗池或贝类育苗池条件,就地采苗不仅减少 了亲贝蓄养、幼虫培育过程,而且减少了采苗器的长途运输,提高异地育苗池的利用率,能 够充分发挥生产单位的潜力,优势互补。此外,眼点幼虫的运输简便易行,且成本低廉,是 一项很有推广前途的苗种生产方法。
六、稚贝培育
幼虫附着变态后即成为稚贝。这期间要加大投饵量及换水量,以满足其生长发育的 需要。同时要逐渐降低水温,增加光照,使室内环境逐步与外界自然环境一致。稚贝生长 较快,壳长日增长达100μm以上,一般在室内培育7~10 d即可出池。
七、稚贝海上暂养
稚贝附着后5~7 d,壳长生长到800~1 000 μm时就可以出池了。具体出池时间的 确定,除根据天气预报外,还应考虑避开藤壶、贻贝等附着生物的附着高峰期。稚贝出池 后挂到海区筏架上暂养,此时稚贝生长速度很快,在海区水温25℃左右条件下,出池后1 个月的稚贝,平均壳长可达24~30 mm。因此,适时出池对加快稚贝生长,早日分散养成 是有利的。