水产百科

急性毒性试验

2023-02-09

acute toxicity test测定高浓度污染物在短期(一般不超过96小时)内对渔业生物所产生的急性中毒效应,用以评价污染物毒性的一种毒性试验方法。

目的 通过急性毒性试验可以在一定程度上综合反映出水体的污染状况和污染物毒性的大小和性质;为确定渔业环境中毒物的半数致死浓度和制定渔业水质标准提供依据。此外,可供进行亚急性毒性试验和慢性毒性试验选择毒物浓度时作参考。

方法 分为静水试验和流水试验两大类。静水试验在试验过程中受试生物对氧的消耗量较小,作试验的化学物质相对稳定,并能在短期内得出结果。由于这一类试验设备简单,方法易行,国内外大多采用。流水试验在试验过程中要求提供恒流装置,试液至少每6小时更换一次,并及时除去受试生物的代谢产物。急性毒性试验期间一般不喂食。

受试鱼的平均体长以7厘米以下为合适,金鱼体长3厘米以下为合适,同组鱼中体长差别不得超过1.5倍。将受试鱼随机分组,每组用鱼以20尾为宜。试验前经1周到10天的驯养,驯养期每天投饵1次,换水1~2次,要求在试验前4天驯养鱼的死亡率应小于10%。

试验容器以深度超过15厘米的圆玻璃缸或白搪瓷桶为宜。所盛溶液量,静水试验以每升容纳1克鱼计算,流水试验以每小时每克鱼需要0.2毫克氧的平均耗氧来计算,以维持试液的稳定性。

为保证试验过程中渔业生物对氧的需要,静水试验中的供氧,可采用更换新鲜实验液或用事先经过充氧的稀释水来配制;流水试验以调节水体流速来满足氧的需要。

步骤 分为探索性试验、正式试验和观察记录三步。

探索性试验 初步选用3~5种浓度,每种浓度用3~4尾试验鱼,试验时间为24~48小时,找出试验鱼全部死亡和不引起死亡的浓度,作为确定正式试验的浓度范围,并随时观察试验鱼中毒的表现,如鳃、体色及行为的变化,供选择观察指标参考。

正式试验 正式试验时间一般要求96小时,不得少于48小时。根据探索性试验得到的浓度范围,按等对数间距插入3~5个中间浓度,其中必须包括使试验鱼在24小时内完全死亡和96小时内不发生中毒的浓度,同时设一个对照组。当各浓度组的实验液配好后,可从低浓度到高浓度依次放进受试生物。

观察记录 包括:①理化指标。试液的溶解氧、pH值、水温、浊度、硬度等,用以检查试验条件的稳定性,排除由于条件的变化可能带给试验生物的影响。②生物指标。包括死亡率和由于中毒而引起的鱼的行为、生理和形态的变化,必要时做毒理组织学检查。③鱼死亡判断。当鱼中毒停止呼吸后,一般用镊子夹住鱼尾部,5分钟内没有产生刺激反应,可以判定为死亡。试验必须记录24、48、96小时各浓度组内鱼的死亡数。在96小时内没有死亡的鱼,可以认为毒性不显著,但不能作为无毒的根据。还要从鱼的形态、生理等是否改变才能最后确定。死亡鱼应立即从容器中移出,以免影响水质。

根据测试结果,在半对数坐标纸上用直线内插法求得半数致死浓度(LC50),用来判断试验毒物的毒性。以白鲢为例,96小时LC50的常用毒性分级标准为:高毒<1毫克/升,中毒1~10毫克/升,低毒>10毫克/升。