放卵密度 土池孵化一般每平方米水面放卵2 500~3 000颗; 水泥池孵化一般每平方米水面放卵5000~6 000颗;网箱孵化一般每平方米网箱水面放卵10 000~15 000颗。
放卵方法 受精卵移放到孵化池,应尽量保持黑点朝天的方向。若白点朝天的较多,则应用手拨动水面使黏在水草上的蛙卵得以轻微震动,自动转位,使黑点重新朝天。受精卵颠倒位置太久,将会严重影响其孵化率。放卵时,还应把卵块与附着的水草均匀分摊,切勿使其黏连成团块状。如果蛙卵已黏连成团块状,则应用剪刀将其胶膜剪开,将其分成薄薄的一层卵黏在悬浮的水草上。否则,黏连成团蛙卵块因得不到充足的氧气而发白死亡。
孵化管理
增氧 牛蛙受精卵孵化时溶氧量的要求特别高。孵化池水中的溶氧量一定要保持与5mg/L以上。若溶氧量降至2mg/L以下,孵化的胚胎就会因缺氧而引起大批死亡。池水保持缓慢的流动是增氧最有效的办法。若用静水孵化,则应用气石增氧,务使溶氧达到5mg/L以上。
控温 牛蛙受精卵孵化时的最适水温为22~28℃,温差最好不超过2~3℃。但在4月下旬至5月上旬蛙卵孵化期间,气候很不稳定,气温、水温变化甚为剧烈,给蛙卵的孵化带来很大影响。水温调控常用的方法有二: 一是在水泥池上方加盖尼龙薄膜,一般能使池水水温升高2℃左右; 二是加微型电热棒,使孵化池水温恒定在23~25℃。
遮光 强烈阳光的直射和暴晒会严重影响牛蛙受精卵的孵化,有时甚至会将黏附在水草上的孵化蛙卵晒白晒死。因此,孵化池上空要搭荫棚遮阳,还可防止暴雨直接冲淋孵化池,起一定的保温作用,更有利于孵化。
除害 癞蛤蟆、小青蛙、龙虱和剑水蚤等均是牛蛙受精卵孵化过程中的天敌,对受精卵及刚变态的小蝌蚪为害十分严重。龙虱、剑水蚤直接咬破受精卵,癞蛤蟆、小青蛙则直接吞食刚变态的小蝌蚪。因此,在牛蛙受精卵孵化过程中一定要做好防止敌害生物侵入的工作。在孵化池进水管口上缚扎密眼的聚乙烯网布 (40目/cm2) 是阻止龙虱、剑水蚤等敌害生物进入孵化池的有效方法。用纱窗网布遮盖孵化池口则能阻止蛤蟆、青蛙的侵入。对于已侵入孵化池的蛤蟆等敌害生物则应千方百计地捕捉和杀灭,切勿让其留存危害。
孵化注意事项 同一天采集的牛蛙受精卵放于同一只或同一批孵化池孵化; 不同一天采集的蛙卵则放于不同的孵化池孵化,尽量使同池孵化的牛蛙蝌蚪同时出膜; 孵化池在每一批受精卵孵化结束后均应放水清扫,池底池壁洗刷干净后再投入使用。否则,水泥孵化池底部很快生长清泥苔,影响再孵化。
胚胎发育 牛蛙早期胚胎发育外部可见的主要形态变化特征是其胚胎发育分期的主要标志 (图7-1-12)。现分别介绍如下:
未受精卵 (unfertilized egg) 直径1.0~1.5mm,卵子呈黑、白两色。黑色多,约占卵表面积的3/5左右,白色少,约占卵表面积的2/5左右。
受精卵期 牛蛙卵子受精后,受精膜 (fertilization membrane) 从卵子表面隆起,胚体与受精膜之间出现卵周隙。卵外胶膜吸水膨胀,逐渐扩大。卵能在卵周隙内自由转动。受精后约0.5h左右,便具有自动调整方向的能力,即卵子的黑点 (动物极) 朝上、白点 (植物极)朝下。即使人为地逆转过来,在几分钟内又会自动复位。这是证明卵子已经受精的一个明显特征。
2细胞期 牛蛙卵子受精1.5h左右即开始第一次卵裂。分裂面从动物极到植物极,将受精卵分为左右相等的两个细胞。这一时期所经历的时间约为0.5h左右。
4细胞期 在动物极 (animal pole) 与第一次卵裂面相垂直处出现卵裂沟,向植物极 (vegetative pole)进行第二次经裂。卵裂后的四个细胞大小相等。这一时期所经历的时间亦为0.5h左右。
8细胞期 这是牛蛙受精卵的第三次卵裂 (cleavage),分裂沟在受精卵赤道上的40°处。这一次卵裂是纬裂,把四个细胞分裂成八个,靠近动物极的四个细胞小些,靠近植物性的四个细胞大些。
16细胞期 这是牛蛙受精卵的第四次卵裂,系两个经裂。形成16个细胞。这时期的各个细胞大小不一致,排列也不大规则。
32细胞期 这是牛蛙受精卵的第五次卵裂,系纬裂,在受精卵赤道上约67°和赤道下约13°处同时出现卵裂沟,形成共四层每层八个的大小不一致的32个细胞的胚胎。
图7-1-12 牛蛙胚胎发育图
1.受精卵 2. 2细胞期 3. 4细胞期 4. 8细胞期 5. 16细胞期 6. 32细胞期
7. 64细胞期 8.桑椹胚期 9.原肠胚期 10.神经胚期 11.尾芽期 12.肌肉效应期
13.出膜期 14.鳃盖褶期 15.小蝌蚪 (腹面观) 16.小蝌蚪 (侧面观)
(仿龚泉福)
64细胞期 这是牛蛙受精卵的第六次卵裂,系经裂。将32个细胞卵裂为64个细胞。从这次分裂起,卵裂不同步,细胞排列也失去了规律性。
桑椹胚期 牛蛙受精卵已分裂为很多个细胞,但细胞界限仍非常明显,胚胎形如桑椹,故称桑椹胚期(morula stage)。在孵化水温为25~28℃时,桑椹胚期约于受精后的5~6h出现。
囊胚期 (blastula stage) 此时期牛蛙受精卵动物极细胞分裂快,植物极 (vegetative pole) 细胞分裂慢,在动物极 (animal pole) 一端出现囊胚腔,并随着细胞分裂而迅速增大。
原肠胚期 (gastrula stage) 牛蛙受精卵继续分裂,胚胎进一步发育,动物极细胞向下包围植物细胞(外包围),植物极细胞内陷,最后动物极细胞将植物极细胞全部包围,胚孔封闭,形成一个空腔即原肠腔。原肠腔即是未来的消化道,其开口即是将来肛门的位置。
神经胚期 (neuroderm stage) 原肠胚背部的外胚层细胞加厚形成神经板。神经板 (neural plate) 两侧增厚并隆起形成神经褶 (neural fold),最后靠拢合并成为神经管。同时胚体前后拉长。
尾芽期 (caudal bud stage) 胚体后背部有明显的尾芽翘出。从这时开始,前面分裂所形成的胚层逐步发育成为牛蛙的各种器官和组织。
肌肉效应期 胚体能做半环形的收缩扭曲,牛蛙小蝌蚪即将出膜。
蝌蚪孵出期 牛蛙小蝌蚪孵化出膜,侧卧孵化池底,受水力等机械刺激时能作短时间的螺形游动。刚孵出的牛蛙蝌蚪全长约5mm左右。至心脏搏动时,牛蛙蝌蚪大部分孵化出膜。牛蛙蝌蚪孵化出膜后,其胚胎的发育仍在进行着,鳃、口、唇、牙、眼、血管、血液等器官和组织进一步进行发育和生长。
表7-1-9 牛蛙受精卵孵化发育时程表(25~30℃)
发 育 时 间 | 经历时间 | 本时期发育时间 | 胚长(mm) |
1.未受精卵 | — | — | — |
2.受精卵 | — | 1h30min | 1.45 |
3.2细胞期 | 1h30min | 30min | — |
4.4细胞期 | 2h | 30min | — |
(续)
发 育 时 间 | 经历时间 | 本时期发育时间 | 胚长(mm) |
5.8细胞期 | 2h30min | 30min | — |
6.16细胞期 | 3h | 25min | — |
7.32细胞期 | 3h25min | 30min | — |
8.64细胞期 | 3h55min | 1h | — |
9.桑椹胚期 | 4h55min | 2h15min | — |
10.囊胚期 11.原肠胚期 12.神经胚期 13.尾芽胚期 14.肌肉效应期 15.出膜期 | 7h10min 9h40min 17h50min 35h 39h30min 49h10min | 2h30min 8h10min 17h10min 4h30min 9h40min 9h30min | 1.50 2.00 2.35 2.90 4.20 4.90 |
水温25~30℃时,从受精到出膜,牛蛙受精卵孵化约需2.5~3d时间,其发育时程表列于表7-1-9。 刚孵出的小蝌蚪十分嫩弱,依靠卵黄囊的营养维持生命。孵化管理中稍有不慎,即会大量死亡。因此,仍需让其在孵化池中继续发育。待其鳃盖发育完成,吸盘退化,卵黄囊(yolk sac)完全消失后即应开食投饲,进入蝌蚪的培养管理。如果牛蛙蝌蚪刚出膜就立即饲喂蛋黄、豆浆,因小蝌蚪口器尚未发育完整,无法摄食,投喂的饲料培养了大量的水蚤,会导致孵化池严重缺氧,蝌蚪、水蚤同池覆灭。