发情特征 每年4～5月是生殖季节 (reproductive season)。雄蛙发情的特征是前肢第一趾基部内侧的婚姻瘤格外明显，呈肉红色，又大又红。同时，不停高声鸣叫，以此招徕雌蛙。发情高潮到来时，雄蛙每小时鸣叫声可达100～120次，并追逐雌蛙，拥抱雌蛙。雌蛙发情的特征是摄食量减少，徘徊于水中或岸上，并循着雄蛙的鸣叫声寻找雄蛙，向雄蛙靠近，同时发出低沉的 “咔、咔” 的应和声，依恋在雄蛙左右不离开。当雌蛙发情高潮来临时，则向鸣叫的雄蛙处跳跃，寻找拥抱，让雄蛙跳骑到自身背上，接受雄蛙的拥抱。牛蛙雌雄亲蛙抱对的时间长短不一，通常是1～2d，有时也会长达3d之久。发现牛蛙亲蛙抱对了，养蛙者应立即作好采卵和人工孵化的各项准备工作，以便及时采集受精蛙卵进行人工孵化。
自然产卵 在繁殖生产中，牛蛙一般都能自然产卵受精。长江中下游地区，牛蛙的初产期一般在每年的4月下旬，盛产期大多在每年的5月，终产期一般为7月初，但也有推至每年的9月初，即所谓的 “秋繁”。牛蛙秋繁，受精率低，孵化率也较低。牛蛙自然产卵均于雌雄亲蛙抱对、发情 (sexual heat) 达到高潮时进行。此时雄蛙用前肢紧抱雌蛙腋窝，并作有节奏的松、紧动作，刺激雌蛙剧烈地收缩腹部。雌蛙此时背驮雄蛙，除臀部及泄殖孔外全身浸没于水中，两后腿呈 “八” 字形伸展，泄殖孔口朝上露出水面，用力借助腹部肌肉的强烈收缩将卵子连续不断的产出。与此同时，伏于雌蛙背上的雄蛙射放精子于产出的卵子上进行受精。受精卵一接触水面，雄蛙便用后腿拨开卵子，使之形成一层薄薄的卵膜漂浮于水面，带有密密麻麻的黑点彼此黏连成一片，或黏附在水草上。精子放完，雄蛙即从雌蛙背上下来，双腿入水一蹬，远离产卵区(spawning area)。牛蛙自然产卵 (spontaneous spawn) 时要求安静，背风，无人畜干扰。岸边水域要长有水草，产卵区水深一般为30～40cm。卵一般产在水草较多的池边，并于水草黏连。产卵的时间大多在早晨4～8时。盛产时，中午也产。雨天一般不产卵。但如果前一天下雨，随后转晴的第二天或第三天的早晨则是牛蛙产卵的高峰时间。牛蛙产卵的时间随产卵量多少有一定的差异，一般是10～20min。牛蛙卵呈球形，卵径1.0～1.5mm，卵外包裹胶质膜，遇水即吸水膨胀，卵块 (egg mass) 面积亦随之扩大。牛蛙产卵，如果生态条件不适宜或突变，如人畜惊吓等，有可能出现滞产和难产。卵子在输卵管 (oviduct) 和泄殖腔中滞留时间太长导致过熟，胶质膜 (gelatinous coating) 浓缩成团状，不能分散，很难产出。即使产出，也成团块状，无法授精。更因雄蛙受惊吓逃离雌蛙，没有精子可供授精。刚产入水中的卵子是否受精，肉眼难以区别，但过2～3h后即可观察分辨。受精卵晶亮透明，卵中黑点大而清晰，胚胎发育正常; 未受精卵浑浊发暗，卵中无黑点而有不透明的粉斑，逐渐腐烂。
人工催产 一定要选择体质健壮，性腺发育良好，无伤无病的优质亲蛙进行人工催产。催产剂有牛蛙脑垂体 (PG)、绒毛膜促性腺激素 (HCG) 和促黄体生成素释放激素类似物 (LRH-A)。催产剂的用量根据牛蛙亲蛙的大小确定。体重400～500g的雌蛙用蛙脑垂体8～10个或HCG5000IU或LRH-A400～500μg。也可用4～5个蛙脑垂体加LRH-A250～300μg加HCG500～600IU制成混合催产剂，溶于生理盐水，每只雌蛙注射1～1.5ml，雄蛙剂量减半。注射方法有二： 臀部肌肉注射： 将针头按45°角刺入牛蛙大腿，进针1.5cm，一次性注射催产剂量; 腹腔注射： 一人左手握住雌蛙头部，用大拇指与食指夹住其前肢，右手握住其后肢，使蛙腹部向上，防止蛙后蹬跃起。另一人右手握住注射针筒，左手用镊子夹起蛙腹部皮肤，然后将针头按水平方向进针2～3cm，使针头穿过皮肤和腹肌。一次性注射所需催产剂量。退针时用手指捏住针头入口处的皮肤后快速拔出针头，防止催产药物外流。腹腔注射，操作一定要小心，切勿粗心大意损伤亲蛙内脏。将注射催产剂后的雌雄亲蛙按1∶1比例放入产卵池，每2～3m2蛙池放亲蛙1对，产卵池水深30～40cm。水温25～28℃时催产后1d的雌雄亲蛙便会抱对，约过2d便会产卵、射精，进行体外受精 (externalferilization)，约经10～15min便产完卵，受精率可达90%以上。也可通过人工授精的方法，使成熟的卵子和精子结合，完成受精过程。人工授精一般在催产药物注射30～40h后，用手挤压雌蛙腹部能顺利排出卵子时进行。若挤压腹部卵子不能顺利排出则需等待一段时间，直到卵子能顺利排出。此时，即可将雄蛙杀死，用剪刀剖开其腹部，再用镊子取出豇豆粒大小的两颗精巢，轻轻地放在过滤纸上滚动，吸干血液和水分，除去黏附在上面的其他结缔组织，然后将精巢放在研钵中轻轻研碎成浆，再加入10～15ml0.7%生理盐水搅拌几下制成牛蛙精子悬浊液。与此同时另一人将雌蛙的卵子快速挤入配制好的精子悬浊液的器皿中，边挤卵边用羽毛轻轻搅拌卵子和精液，使卵子和精子充分接触，提高受精率。牛蛙人工授精应于水温22～28℃时进行，人工授精率可高达95%左右。水温低于18℃和高于32℃，受精率大大降低。人工授精的蛙卵在器皿中静置5～6min后即可移放于孵化池中孵化。
卵子采集 卵子应及时采集移入孵化池孵化。在牛蛙生殖季节，每天早上8～9时，养蛙者应到产卵池巡池一周，特别是夜间雄蛙鸣叫不停和雨过天晴后的次日早上，往往是牛蛙的盛产期，更应加强巡塘，搜寻已产卵子。若发现已产卵块，养蛙者应立即入池采集，不能使卵块久留于产卵池中，以免池内亲蛙活动打散卵块和鱼类吞食蛙卵。被亲蛙打散的蛙卵往往沉溺产卵池水底窒息而死亡。蛙卵最好于产卵后0.5～1h内采捞。采卵时，人进产卵池，手持锋利的剪刀，先将卵块四周黏附的水草剪断，再剪断卵块下面的水草，水草不可留得太多。然后将卵块 (egg mass) 连同附着的水草等附着物一道和水轻轻移入盆、桶等内壁光滑的容器中，运到孵化池，再慢慢地将盛卵容器放入孵化池水中，倾斜容器，轻轻将蛙卵连同黏着的水草移入孵化池孵化。如果卵块过大，一个容器一次不能盛下，可用剪刀将卵块胶膜剪断，把大卵块分成几块小卵块分别搬运。牛蛙受精卵外的胶膜柔软滑腻，黏性强，遇粗糙物容易粘连且会伤及胚胎。因此不宜用抄网等粗糙物具采捞蛙卵。除此之外，采捞蛙卵时还应充分注意： 自然产于水面的牛蛙卵子全部是黑点 (即胚胎的动物极) 朝天空，人工采捞时移入容器内的蛙卵亦应尽量保持黑点向上; 已被亲蛙打散、沉于水底的卵块应用手先将其捞到水面，再将其摊附在水草上，使之飘浮于水面，并洗净卵块上的糊泥，再捞入容器中搬运至孵化池孵化; 采集蛙卵时，如果发现产卵块附近有正在产卵的亲蛙，则千万不要惊动它们，应等它们产卵和排精结束后再采集; 产于青泥苔 (水绵) 上的蛙卵不要搬运到孵化池孵化，产卵池中的青泥苔在牛蛙繁殖前应加以捞除和杀灭，切勿让其在产卵池中生存和生长。
卵子计数 由于亲蛙个体大小的差异，所产卵子的数量多寡相差悬殊。采集的蛙卵应先计数，以便较为合理地安排孵化生产。然而由于牛蛙卵子产在水中，而且绝大多数黏附在水花生等水生植物上，卵群或方、或圆、或多边形、长带形漂浮于水面。从而给精确计数牛蛙产卵量增加了难度。目前生产上一般采用面积法或体积法加以估计。面积估计法是首先尽量精确地测准产于水面的蛙卵总面积，然后从中选取卵粒分布密度较为均匀的小面积实际计数卵粒数，求出单位面积的卵粒数，最后据此估计总卵数; 体积法则是首先将采到的牛蛙卵子用塑料窗纱滤去游离的水分，然后将此蛙卵倒入500～1 000ml的大量筒。精确测量其总体积。再用10ml的小量筒精确取出5ml卵精确计数，求出单位体积的卵粒数。最后据此估计总卵数。