1.亲鱼选择
我国不是大菱鲆的原产地，所以主要依赖于从养殖群体中挑选亲鱼。大菱鲆亲鱼在一般繁殖条件下，只有50%左右的雌鱼在生产季节排卵，其他雌鱼或者不产卵或者产卵延后，且卵子的质量变化较大，所以苗种繁育场应保有充足的亲鱼数量，通常以100多尾为宜。
大菱鲆为雌雄异体，缺乏第二性征。雌雄亲体的区别主要通过周期性的发育过程而逐步显现出来。雌性个体较大，产卵前身体的肥满度增大，性腺隆起明显;雄性个体相对较小，成熟期身体的肥满度一般，性腺部位不突出。
选择体型完整、色泽正常、健康活泼、体表光亮、集群性好的3～4龄的个体作为亲鱼。最好从多家养殖场选购，混合饲养，提高遗传基因的杂合度，从而保证优良的种质。雌雄比为1：1，单茬育苗需亲鱼60～200尾，放入20～60米2的圆形池或方形池，放养密度1～3尾/米2，或3～5千克/米3。
2.亲鱼培育
亲鱼培育的环境条件应符合下列要求：水质清澈透明，符合国家渔业水质二级标准(可咨询当地渔业行政主管部门);光照度60～600勒克斯，池顶及周围遮光，以利于全人工光周期控制;水温8～15℃，盐度28～35;pH值7.8～8.2;溶解氧>7毫克/升;氨氮<0.1毫克/升;流水的水交换量至少为2～6个全量。亲鱼培育车间要求保持环境安静，禁止噪音和人员活动干扰。
亲鱼培育密度会影响受精卵的质量，养殖密度低，卵的质量好。亲鱼培育饲料有软颗粒饲料、干颗粒饲料、经消毒的优质鲜杂鱼等。软颗粒饲料主要成分为粉状配合饲料、优质鲜杂鱼等，经冷冻贮存备用。饲料颗粒应大小适口。颗粒饲料的日投饲量为鱼体重的1%～2%，鲜饲料的日投喂量为3%～5%，每日投喂1～2次。亲鱼饲料中需要适量添加维生素C、维生素E及卵磷脂等营养物质，可以有效促进性腺的发育，提高亲鱼的产卵量和受精卵质量。建议最好完全选用亲鱼专用干颗粒饲料喂养亲鱼，以防病原生物的入侵。
大菱鲆在大西洋沿岸自然产卵为春季，但在人工养殖条件下，驯化的亲鱼通过控温、控光，则可实现全年产卵。亲鱼培育车间应设置全人工光温控制条件，照明灯可安装在亲鱼水槽的盖板下面，也可以安装在有遮光幕的亲鱼池上方，离水面1～1.2米。光照时间由每天8小时逐渐增至每天16小时，水温由8℃逐步增至14℃。如此经过连续2个月的调控，即可使亲鱼分期、分批成熟。
3.人工授精
人工调控培育的亲鱼，雄性成熟早，腹部不突出;雌性成熟晚，腹部突出，膨胀程度随成熟度的提高而增加。成熟亲鱼无其他明显副性征和生殖行为，一般不会自然产卵受精，人工采卵授精非常重要。因此，要密切注视亲鱼的发育动态，经常检查，选择适宜采卵时间，及时采卵授精。集中采集繁殖盛期的精、卵进行人工授精，是确保受精卵优质高产的关键。大菱鲆每尾雌鱼都有规则的排卵间隔，但个体的排卵周期有所不同。短的60(±4)小时，长的113(±2)小时，大多数在80～90小时。在12～14℃时，必须在排卵后10小时之内挤卵，才能保证卵子最大成活，这一时限受水温影响。
人工授精时，先擦干鱼体和器皿，防止水及排泄物混入。然后按1×105粒卵加入1～5毫升精液，快速搅拌均匀使精卵充分接触。再加入少量经沉淀沙滤的海水，使精液、卵子、水的体积比约为0.5：100：100，继续搅拌1分钟。然后静置5分钟，再加入海水。静置10～15分钟，待吸水膨胀后，清水冲洗1～2次，放入2升量筒中，加海水使上浮卵和沉淀卵分离。记录上浮卵数，上浮卵经消毒后放入孵化器中孵化。