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一步生长曲线

最近更新:2023-03-31

one-step growth curve又称一级生长曲线。定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线。因它 可反映每种噬菌体或病毒的3个最重要的特征参数——潜伏期、裂解期和裂 解量,故十分重要。

T4噬菌体的一步生长曲线

1.潜伏期:指噬菌体的核酸侵入寄主细胞后至第一个成熟噬菌体粒子 装配前的一段时间。它又可分为两段:①隐晦期,指在潜伏期前期人为地(用 氯仿等)裂解寄主细胞后,此裂解液仍无侵染性的一段时间,这时细胞内正处 于复制噬菌体核酸和合成其蛋白质衣壳的阶段;②胞内累积期,即潜伏后期, 指在隐晦期后,若人为地裂解细胞,其裂解液已呈现侵染性的一段时间,这意 味着细胞内已开始装配噬菌体粒子,并可用电镜观察到。

2.裂解期:紧接在潜伏期后的寄主细胞迅速裂解、溶液中噬菌体粒子急 剧增多的一段时间。噬菌体或其他病毒粒因只有个体装配而不存在个体生 长,再加上其寄主细胞裂解的突发性,因此,从理论上来分析,其裂解期应是 瞬间出现的。但事实上因为寄主群体中各个细胞的裂解不可能是同步的,故 出现了较长的裂解期。

3.平稳期:指感染后的寄主细胞已全部裂解,溶液中噬菌体效价达到最 高点的时期。

一步生长曲线的基本实验步骤为:用噬菌体的稀释液去感染高浓度的寄 主细胞,以保证每个细胞所吸附的噬菌体至多只有一个。经数分钟吸附后, 在混合液中加入适量的相应抗血清,借以中和尚未吸附的噬菌体。然后用保 温的培养液稀释此混合液,同时终止抗血清的作用。随即置于适宜的温度下 培养。其间每隔数分钟取样,连续测定其效价,再把结果绘制成图即可。