two layers plating method测定噬菌体效价即噬菌斑形成单位(pfu)的一种常用方法。主要操作步 骤为：预先分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底 层培养基在培养皿上浇一层平板，待凝固后，再把预先融化并冷却到45℃以 下，加有较浓的敏感寄主和一定体积待测噬菌体样品的上层培养基，在试管 中摇匀后，立即倒在底层培养基上铺平待凝，然后在28～37℃下保温。一般 经10余小时后即可对噬菌斑计数。此法有许多优点，如加了底层培养基后， 可弥补培养皿底部不平的缺陷;可使所有的噬菌斑都位于近乎同一平面上， 因而大小一致、边缘清晰且无重叠现象;又因上层培养基中琼脂较稀，故可形 成形态较大、特征较明显以及便于观察和计数的噬菌斑等。双层平板法可表 解如下：
