微生物百科

鸟枪法

最近更新:2023-03-31

shot-gun method,shot-gun approach又称散弹射击法。将一个完整基因组切成大量随机片段,然后把它一一 克隆入合适的载体,再从其中选出某一目的基因的技术。一般方法是:利用 一至几种限制性内切酶,或用超声波等方法把某种生物的基因组切割成一一 小片段(大小相当于一个或一个多基因),然后把它们一一与载体组成重组 DNA分子,转化到细菌的营养缺陷型中进行体内无性繁殖,再利用基本培养 基对所有带有重组DNA的营养缺陷型进行培养。如果其中某一营养缺陷型 能生长在基本培养基上,就说明引入其中的重组DNA片段中含有目的基因, 从这种菌株中就可分离出目的基因。利用本法可建立各种基因的无性繁殖 系(克隆)。所制备的克隆数目多到可将某种生物的所有基因均包括在内,这 时,这一组克隆的总体就是某种生物的基因文库。